在于將特異性結(jié)合于固相上的抗原(抗體)與溫育過程中吸附的非特異性成份分離,使免疫復(fù)合物與待測抗體(抗原)呈一定比例,洗板是否合格直接影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。洗板應(yīng)嚴(yán)格按照說明控制洗板時間及洗板次數(shù),
上海ELISA試劑盒洗板ELISA檢測一般用洗滌液洗板3次,洗滌液應(yīng)嚴(yán)格按照操作說明進行稀釋,洗液應(yīng)注滿每個微孔并注意洗液不外溢,垂直甩板避免交叉污染,防止出現(xiàn)假陰性及假陽性結(jié)果。使用洗板機洗板可一定程度上避免環(huán)境污染、提高工作效率,洗滌開始時注意觀察每根吸液針是否一直插入孔底并吸干孔內(nèi)全部液體,嚴(yán)格按照要求設(shè)置一定的洗板時間及洗板次數(shù)。洗板過程中注意沖力大小,避免沖力過大導(dǎo)致酶結(jié)合物丟失,吸光度值偏低。洗液應(yīng)根據(jù)不同廠家的酶標(biāo)板調(diào)整注水量,注意不要溢出孔外;稀釋洗液所用的蒸餾水或去離子水酸堿度適中,使配出的洗液pH在7.2——7.6范圍內(nèi),用非金屬容器保存,保持液體新鮮無污染、沉淀。洗板結(jié)束后將板拍干,應(yīng)垂直扣在備好的干凈的吸水紙或毛巾上,且注意每次更新干凈的吸水紙或毛巾。
上海ELISA試劑盒洗板時應(yīng)注意以下問題:
(1)需每天校正注液量及殘液量,洗滌后殘液量不得大于2μl;
(2)及時更換破損吸液針,避免破壞底板包被;
(3)針對不同廠家酶標(biāo)板注意調(diào)整吸液頭下降高度,避免沖洗針頭卡住酶標(biāo)板;
(4)注意調(diào)整洗液量,洗液量過多將溢出,過少將達不到洗滌效果;
(5)關(guān)機前使用蒸餾水沖洗管道,避免洗液的結(jié)晶物堵塞管道;
(6)不同種試劑盒的洗液嚴(yán)禁混合使用。
上海ELISA試劑盒洗板可能碰到的問題有:
1.采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉;
2.采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差;
3.反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。