果糖-1,6-二磷酸(FDP)測試盒實驗科研
產品說明: 果糖 1,6-二磷酸(fructose-1,6-diphosphate, FDP)是糖酵解過程中的一種重要的中間產物,對多種酶具有調節 作用,具有改善細胞能量代謝、增加能量利用、抗心律失常及抗組織過氧化等作用,廣泛應用于臨床醫藥。
醛縮酶催化果糖 1,6-二磷酸裂解,產物與 2,4-二硝基苯肼在酸性介質中反應生成 2,4-二硝基苯腙,在堿性溶液 中呈紅棕色,在 540 nm 處有特征吸收峰
注意:實驗之前建議選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者 增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、低溫臺式離心機、水浴鍋/恒溫培養箱、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器、冰 和蒸餾水、EP管。
樣本處理 1. 組織:按照質量(g):提取液一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液一)加入提取 液一,冰浴勻漿后于4℃,12000g離心10min,取0.8mL上清液,再加入0.16mL提取液二,4℃,12000g離心10min 后取上清待測。 2. 細胞:按照細胞數量(10 4個):提取液一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液 一)加入提取液一,冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);于4℃,12000g 離心10min,取0.8mL上清液,再加入0.16mL提取液二,4℃,12000g離心10min后取上清待測。 3. 血清(漿):取100μL血清(漿)加入1mL提取液一,4℃,12000g離心10min,取0.8mL上清液,再加入0.16mL提取液二,4℃,12000g離心10min后取上清待測。